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液相色譜儀分析中色譜峰拖尾的原因分析
更新時(shí)間：2021-03-26
技術(shù)文章
液相色譜儀分析中色譜峰拖尾的原因有色譜柱被污染、柱外死體積、樣品過(guò)載、樣品溶劑過(guò)強(qiáng)、組分共流出、流動(dòng)相pH值在樣品pKa附近和填料表面惰性不好等。
一、色譜柱被污染：
如果色譜柱開(kāi)始使用時(shí)峰形正常，使用一段時(shí)間后逐漸出現(xiàn)峰拖尾，則色譜柱被污染的可能性很大。這時(shí)需要對(duì)色譜柱加強(qiáng)沖洗，即使用比方法流動(dòng)相更強(qiáng)的溶劑沖洗色譜柱。
建議做好樣品前處理，但如果前處理后依然比較臟，強(qiáng)烈建議配置保護(hù)柱。一旦峰形變差，柱效下降，應(yīng)及時(shí)更換保護(hù)柱芯。
二、柱外死體積：
較大的柱外死體積會(huì)導(dǎo)致峰形展寬和峰拖尾，建議仔細(xì)檢查樣品經(jīng)過(guò)的所有管路和各連接部位，使用合適的管線和接頭。
三、樣品過(guò)載：
減小進(jìn)樣體積或稀釋樣品。
四、樣品溶劑過(guò)強(qiáng)：
樣品溶劑強(qiáng)度應(yīng)不高于流動(dòng)相洗脫強(qiáng)度。使用流動(dòng)相溶解樣品或使用比初始比例流動(dòng)相洗脫能力更弱的溶劑溶解樣品。
五、組分共流出：
如果一小峰包含在一大峰的后面，需要做好色譜條件的優(yōu)化，有條件時(shí)可利用PDAD檢查峰純度。
六、流動(dòng)相pH值在樣品pKa附近：
流動(dòng)相pH值在樣品pKa附近時(shí)，樣品解離平衡不充分，容易出現(xiàn)前沿峰或拖尾峰，所以流動(dòng)相pH值應(yīng)盡量選在樣品pKa±1.5以外。
七、填料表面惰性不好：
鍵合硅膠型填料表面的殘留硅羥基或金屬雜質(zhì)易與待測(cè)化合物發(fā)生二次作用而導(dǎo)致拖尾。建議：
1、選用高純硅膠合成填料的色譜柱和進(jìn)行了有效硅羥基封端填料的色譜柱。
2、降低流動(dòng)相pH值，抑制硅羥基解離。
3、流動(dòng)相中添加減尾劑，如三乙胺。
4、使用不同的有機(jī)溶劑。
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